Caracterización de cepas de Rhizobium leguminosarum bv. phaseoli mediante la técnica de Elisa y la resistencia a antibióticos.

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Tesis - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Programa de Química

Incluye bibliografía p. 57-61

En este trabajo se caracterizaron las cepas LFBN 301, LFBN 308 y LFBN 310 de Rhizobium leguminosarum bv. phaseoli aisladas de los nódulos de plantas de fríjol cultivadas en el municipio de El Peñol (Nariño). Las tres cepas se seleccionaron entre 10 cepas a las que se les determino su infectividad y efectividad. Se escogieron éstas por ser las más infectivas y efectivas. La caracterización se realizó mediante la resistencia intrínseca a los antibióticos estreptomicina y espectinomicina a concentraciones de 10, 15 y 20 g/ml y a 5, 10 y 15 g/ml respectivamente. Las tres cepas presentaron patrones de resistencia/sensibilidad diferentes, lo que permitió identificarlas y diferenciarlas. También se estandarizó y desarrolló la prueba de ELISA directa, una técnica serológica en la que se utilizaron anticuerpos producidos en forma especifica en cuyes (Cavia porcellus) inmunizados con las tres cepas rizobiales (antígenos). En este inmunoensayo enzimático se utilizó la fosfatasa alcalina para marcar los anticuerpos. Esta enzima reacciona con el p-nitrofenilfosfato, produciendo una coloración amarilla que permite identificar cualitativa y cuantitati vamente la presencia del antígeno, ya que la intensidad del color es proporcional a la cantidad de antígeno fijado a la placa.